• Главная
• Новое
• Популярное
• Поиск
• Карта
• Связь

Результаты и обсуждение

Экспериментальная генетика и физиология / Популяционные аспекты изучения морфологической изменчивости цестоды proteocephalus percae (cestoda: proteocephalidea) в онтогенезе / Результаты и обсуждение

Страница 1

Спектры поглощения оксигемоглобинов изученных нами представителей позвоночных имели характерные максимумы при 415 нм (полоса Соре), 540-541 нм (в-полоса) и 575-576 нм (а-полоса). Различия в аминокислотном составе и особенностях пространственной структуры белковой части молекулы обусловливают разницу в положении максимумов в спектрах на несколько ангстрем. Изображения пересадка волос на бороду www.wellturkey.ru.

С ростом рН у гемоглобинов с изначально высоким сродством к кислороду (человека, песца и осетра) происходит сдвиг в длинноволновую сторону («красный сдвиг»), что свидетельствует о Т^к-переходе, т.е. о смещении равновесия в сторону высокоаффинной к-конфор-мации. В физиологических условиях (рН 7,4) у гемоглобинов жвачных (быка и барана) отмечен сдвиг а- и в-полос в коротковолновую сторону, отражающий тот факт, что эти гемоглобины

которая может быть описана кинетическим процессом 1-го порядка, зависящим от концентрации гемоглобина (Мisга, Fгidоviсh, 1972):

R^T-равновесие у них сдвинуто в сторону низкоаффинной Т-конформации.

Обнаружена зависимость скорости реакции автоокисления от параметров среды. При низких температурах процесс спонтанного окисления гемоглобинов млекопитающих происходит медленно: в препарате гемоглобина человека накопление 50% метгемоглобина при 40С происходит в течение месяца, а при температуре 26°С — за 132 часа (Стародуб, Назаренко, 1987). Повышение температуры, как и ионной силы раствора, способствуют переходу гемоглобина из окси- в мет-форму.

Зависимости констант скорости реакции автоокисления при t = 43°С от рН раствора для исследованных гемоглобинов представлены на рисунке. Снижение рН приводит к ускорению реакции. При низких значениях рН 5,15 автоокисление начиналось практически при комнатной температуре. Резкое возрастание константы скорости с уменьшением рН, очевидно, является следствием выраженной взаимосвязи между взаимодействием протонов и кислорода с молекулой гемоглобина.

Скорость автоокисления гемоглобина осетра была на порядок выше, чем у гемоглобинов млекопитающих. Это, возможно, связано с адаптационными изменениями свойств гемоглобинов пойкилотермных животных, приводящими к ла-билизации связи молекулы белка с кислородом (Misra, Fridovich, 1972; Wilson, Knowles, 1987).

Скорости автоокисления высокоаффинных гемоглобинов человека и песца в изученном диапазоне рН были больше, чем у представителей жвачных млекопитающих (быка и барана). При сопоставлении с полученными нами ранее (Борисова, Горюнов, 1997) и приведенными во введении данными обнаруживается качественное соответствие между способностью гемоглобинов к автоокислению и устойчивостью соответствующих эритроцитов к температурному лизису. Позвоночные, характеризующиеся более высокой скоростью автоокисления гемоглобинов (человек, песец, осетр), имеют эритроциты, существенно менее устойчивые к термогемолизу по сравнению с эритроцитами барана и быка, гемоглобины которых окисляются с меньшей скоростью.

В основе этой взаимосвязи могут лежать свободно-радикальные процессы, сопутствующие автоокислению гемоглобинов. Известно, что гемоглобин взаимодействует с мембраной эритроцита, а на мембране существуют участки связывания этого пигмента как с белками, так и с фосфолипидами. Активные формы кислорода, образующиеся в каскаде реакций автоокисления, индуцируют процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) в мембранах, а также модифицируют мембраносвязанные белки. Мет-форма гемоглобинов, которая является результатом реакции автоокисления, содержит железо гема в окисленной форме (Ре3+) и также может активизировать в клеточных мембранах ПОЛ.

Зависимость константы скорости (IgK) реакции автоокисления гемоглобинов от рН буфера (430С)

Эти процессы сопровождаются выделением атакующих строму эритроцита супероксид-аниона О2 и перекиси водорода и являются существенным фактором повреждения мембран эритроцитов, которые оказываются менее устойчивыми к гемолизу. Косвенно такое представление подтверждается и тем фактом, что эритроциты рыб, у которых степень ненасыщенности липидов мембран в целом заметно выше, чем у теплокровных животных, проявляли наименьшую устойчивость к тепловому повреждению, поскольку наиболее подвержены ПОЛ ненасыщенные жирные кислоты (линолевая, ара-хидоновая, докозогексаеновая).